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        第一章 血液樣本采集

        醫學檢驗考試吧 2021-10-04 08:50:46

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        第一章 血液樣本采集

        ?

        一、血液生理概要

        ?? 1.血液組成
        ?? 2.血液理化性質
          ①血量:正常人血量約為(70±10)ml/kg體重,成人約4~5L,約占體重的6%~8%。小兒血量與體重之比略高于成人,男性比女性血量稍多,但女性妊娠期間血量可增加23%~25%。
          顏色:血液的紅色來自紅細胞內血紅蛋白。動脈血氧合血紅蛋白含量較高,呈鮮紅色;靜脈血還原血紅蛋白含量高,呈暗紅色。嚴重貧血者血液紅色變淺。嚴重一氧化碳中毒或氰化物中毒者血液呈櫻紅色。
         ?、谒釅A度:pH7.35~7.45。
          比密和滲透量
         ?、傺罕让埽赫D行约s為1.055~1.063,女性約為1.051~1.060,相對黏度為4~5;血漿比密約為1.025~1.030;血細胞比密約為1.090。血液比密與紅細胞含量、紅細胞內血紅蛋白含量有關:血漿比密和血漿內蛋白濃度有關。
         ?、谘獫{滲透量:正常人約為290~310mOsm/(kg·H20)。
          3.血液特性:懸浮穩定性、黏滯性(纖維蛋白原、球蛋白)、凝固性。
          4.血液生理功能:具有運輸功能、協調功能、維護機體內環境穩定和防御功能。
          血液組成


        血液標本類型
         ?、?全血 適用于臨床血液學檢查。
         ?、?血漿 全血+抗凝劑+離心 適用于內分泌激素、血栓與止血檢查。
         ?、?血清 全血+離心(靜置) 適用于臨床化學和免疫學檢測。
          
        不加抗凝劑,血清缺少某些凝血因子,如凝血因子Ⅰ(纖維蛋白原)、Ⅱ(凝血酶原)、Ⅴ、Ⅷ等。
        血漿與血清的區別

        【口訣】:血漿抗凝出凝血
        ????????????? ?血清清白缺因子

        二、采血方法

        (一)靜脈采血法
         
         1.概述
          通常采用肘部靜脈、手背靜脈、內踝靜脈或股靜脈。小兒可采頸外靜脈血液。為避免血小板激活,要使用塑料注射器和硅化處理后的試管或塑料試管。

        (二)皮膚采血法(毛細血管采血法)
          皮膚采血法曾稱為毛細血管采血法,是采集微動脈、微靜脈和毛細血管的混合血,同時含細胞間質和細胞內液。

        1.概述
          部位→手指(WHO推薦左手無名指指端內側)和耳垂。
          耳垂采血痛感較輕,操作方便,但血循環較差,受氣溫影響較大,檢查結果不夠恒定(如紅細胞、白細胞、血紅蛋白和血細胞比容等測定結果比手指血或靜脈血高),一般情況下不宜使用。手指采血操作方便,檢查結果比較恒定。

        2.操作方法
         ?。?)準備:取合適試管,加適量稀釋液。取微量吸管和乳膠吸頭相連,檢查連接處是否漏氣,或取一次性微量吸管備用。
         ?。?)按摩:輕輕按摩左手中指或無名指指端內側,使局部組織自然充血。
         ?。?)消毒:用75%乙醇棉簽擦拭采血部位,待干。
         ?。?)針刺:用左手拇指和食指固定采血部位使皮膚和皮下組織繃緊,右手持一次性消毒采血針自指端腹內側刺入,深度2~3mm,立即出針。
         ?。?)拭血:待血液自然流出后,用無菌干棉球擦去第1滴血。
         ?。?)吸血:用一次性微量吸管吸血,然后用無菌干棉球壓住傷口止血。如血流不暢,可用左手自采血部位遠端向指端稍施壓使血液流出。
         ?。?)稀釋:用無菌干棉球擦凈微量吸管外部,將吸管伸入裝有稀釋液的試管底部,慢慢排出吸管內的血液,并用上清液沖洗管內余血2~3次,最后將試管內的液體混勻。

          3.注意事項
          ●所選擇采血部位無燒傷、凍瘡、發紺、水腫或炎癥等。
          ●本試驗具有創傷性,必須嚴格按無菌技術操作,防止采血部位感染,做到一人一針一管,避免交叉感染,最好用一次性器材。
          ●皮膚消毒后,應待75%乙醇揮發后采血,否則流出的血液擴散而不成滴。
          ●因第1滴血混有組織液,應擦去。如血流不暢切勿用力擠壓,以免造成組織液混入,影響結果的準確性。
        ?????? ●進行多項檢查時,采血的順序依次為血小板計數、紅細胞計數、血紅蛋白測定、白細胞計數等。


        ?????? 【口訣】
        ??????? 靜脈肘部是首選,放血別忘拔針頭,
        ??????? 皮膚通常選手指,嬰兒趾或足跟,
        ??????? 多項檢查小板先。

        (三)真空采血法
          真空采血裝置有套筒式、頭皮靜脈式兩種。真空定量采血容器,根據需要標有不同的色碼,適于不同檢驗項目。


        常用彩色真空采血容器的用途

        蓋子顏色

        添加抗凝劑

        注意事項

        用途

        紅色

        凝塊形成約30min

        化學、血清學、血庫

        紫色

        EDTA ?

        須顛倒混勻6~8次

        全血細胞計數(CBC)

        淡藍色

        枸櫞酸鈉

        須顛倒混勻;血液與抗凝比例為9:1

        凝血檢查(PT、APTT、因子測定)

        綠色

        肝素鈉、肝素鋰、肝素銨

        根據實驗需要,選擇不同類型的肝素

        化學

        灰色

        氟化鈉、草酸鉀

        不能用于其他化學檢查

        葡萄糖、糖耐量、乙醇濃度

        黃色

        多茴香腦磺酸鈉

        須顛倒混勻8次

        血培養

        黑色

        枸櫞酸鈉

        血液與抗凝劑比例為4:1

        血沉

        質量控制
          1.患者:患者活動情況、精神狀態、藥物、年齡、性別、種族、樣本采集時間、吸煙、季節等都會影響檢測結果。
          2.采血:止血帶結扎時間應小于1分鐘,如超過2分鐘,大靜脈血流受阻而使毛細血管內壓增高,使分子質量<5000的物質逸入組織液,或缺氧引起血液成分的變化,使檢查結果增高或減低。
          3.溶血:因容器不潔、接觸水、強力振蕩、操作不慎等可引起溶血,使紅細胞計數、血細胞比容、血漿或血清化學成分(如鉀、鎂、轉氨酶、膽紅素)等多項指標檢驗結果發生變化。
          4.樣本處理:血液樣本采集后應立即送檢,并盡快進行檢查,樣本保存不當直接影響實驗結果。
          5.實驗結果分析:分析結果時,應考慮藥物、飲食等因素對結果的影響。同時,應密切結合臨床。


        三、抗凝劑選擇
          1.乙二胺四乙酸(EDTA)鹽
          常用有鈉鹽(EDTA-Na2·H2O)或鉀鹽(EDTA-K2·2H2O)。
         ?、?抗凝原理:螯合鈣離子。
         ?、?使用方法:量為1.5~2.2mg/ml血液。
         ?、?適用范圍:對血細胞形態、血小板計數影響很小。適用于血液學檢查,尤其是血小板計數。但鈉鹽溶解度低于鉀鹽,有時影響抗凝效果。
          根據國際血液學標準化委員會(ICSH)建議,CBC抗凝劑用EDTA-K2·2H2O。不適于凝血檢查、血小板功能試驗。

          2.草酸鹽
         ?、?抗凝原理:草酸鈣沉淀。
         ?、?適用范圍:雙草酸鹽。
        血細胞比容、CBC、網織紅細胞計數等檢查,不適于血小板計數、白細胞分類計數。
          草酸鹽對凝血因子V的保護作用差,影響凝血酶原時間測定,而且草酸鹽與鈣結合后形成的沉淀物,影響自動凝血儀檢測結果,因此,草酸鹽不適于凝血檢查。
          雙草酸鹽抗凝劑:草酸鉀可使紅細胞體積縮小,草酸銨則可使紅細胞脹大,兩者按適當比例混合,恰好不影響紅細胞形態和體積。
          3.肝素
         ?、倏鼓恚?span style="color: rgb(255, 0, 0);font-size: 20px;">加強抗凝血酶(AT)滅活絲氨酸蛋白酶,從而阻止凝血酶形成,并阻止血小板聚集等作用,從而阻止血液凝固。
         ?、谑褂梅椒ǎ好亢辽焊嗡赜昧繛椋?5±2.5)U,多為肝素鈉鹽或鉀鹽。
         ?、圻m用范圍:紅細胞滲透脆性試驗,肝素可引起白細胞聚集,瑞氏染色后產生藍色背景,不適于CBC、細胞形態學檢查。

          4.枸櫞酸鹽
         ?、?span style="color: rgb(255, 0, 0);font-size: 20px;">抗凝原理:能與血液中鈣離子結合形成螯合物。

         ?、谑褂梅椒ǎ号涑?09mmol/L的濃度。
          ?? 1:9------凝血
        ????????? 1:4------紅細胞沉降率
         ?、?span style="color: rgb(255, 0, 0);font-size: 20px;">適用范圍:凝血、紅細胞沉降率、輸血保養液。

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